Diaqnoz Tibb Mərkəzi
düzgün diaqnoz, keyfiyyətli müalicənin ünvanı!

   

CHECK-UP müayinə Tibbi lüğət Sual cavab Analizin cavabı Məmnun müştərilər
21-09-2012

Äèàãíîñòèêè óðîãåíèòàëüíîãî õëàìèäèîçà

 

Ââåäåíèå

Óðîãåíèòàëüíûé õëàìèäèîç (ÓÃÕ) íå èìååò ïàòîãíîìîíè÷íûõ êëèíè÷åñêèõ ïðîÿâëåíèé, áîëåå òîãî, øèðîêî ðàñïðîñòðàíåíû àòèïè÷íûå è áåññèìïòîìíûå ôîðìû çàáîëåâàíèÿ. Äëèòåëüíûé èíêóáàöèîííûé ïåðèîä, ñâÿçàííûé ñ ìåäëåííûì ðàçìíîæåíèåì ìèêðîîðãàíèçìà, ñêðûòîå òå÷åíèå çàáîëåâàíèÿ, ïðè êîòîðîì äîëãî íåò ðàñïîçíàâàåìûõ ñèìïòîìîâ, çàòðóäíÿþò êëèíè÷åñêóþ äèàãíîñòèêó è ôàêòè÷åñêè äåëàþò åå íåâîçìîæíîé áåç èñïîëüçîâàíèÿ àäåêâàòíûõ è íàäåæíûõ ëàáîðàòîðíûõ ìåòîäîâ èññëåäîâàíèÿ.

 íàñòîÿùåå âðåìÿ äëÿ äèàãíîñòèêè ÓÃÕ èñïîëüçóþò ñëåäóþùèå ìåòîäû:

  1. Êóëüòóðàëüíûé – âûäåëåíèå Chlamydia trachomatis â êóëüòóðå êëåòîê;
  2. Ïðÿìîé èììóíîôëóîðåñöåíöèè (ÏÈÔ) – îáíàðóæåíèå àíòèãåííûõ ñóáñòàíöèé Chlamydia trachomatis â ýïèòåëèè è äðóãèõ òêàíÿõ ïóòåì îáðàáîòêè ïðåïàðàòîâ ñïåöèôè÷åñêèìè àíòèòåëàìè;
  3. Èììóíîôåðìåíòíûé àíàëèç (ÈÔÀ) – îáíàðóæåíèå àíòèãåíà õëàìèäèé â ñîñêîáàõ èç óðåòðû è/èëè öåðâèêàëüíîãî êàíàëà, èëè àíòèòåë êëàññîâ IgA, IgM, IgG ê Chlamydia trachomatis â ñûâîðîòêå êðîâè;
  4. Ïîëèìåðàçíàÿ öåïíàÿ ðåàêöèÿ – îáíàðóæåíèå ÄÍÊ Chlamydia trachomatis â îòäåëÿåìîì èç ìî÷åïîëîâûõ îðãàíîâ.

Ïðè âûáîðå ìåòîäà äèàãíîñòèêè ÓÃÕ ëå÷àùèé âðà÷, â ïåðâóþ î÷åðåäü, äîëæåí ó÷èòûâàòü îïåðàöèîííûå õàðàêòåðèñòèêè êàæäîãî îòäåëüíîãî ìåòîäà, êîòîðûìè ñ ñîâðåìåííûõ ïîçèöèé äîêàçàòåëüíîé ìåäèöèíû ñëóæàò åãî äèàãíîñòè÷åñêàÿ ÷óâñòâèòåëüíîñòü è ñïåöèôè÷íîñòü. Âìåñòå ñ òåì, äàííûå î ÷óâñòâèòåëüíîñòè è ñïåöèôè÷íîñòè ìåòîäîâ äèàãíîñòèêè õëàìèäèéíîé èíôåêöèè, ïðèâîäèìûå â ëèòåðàòóðå, ïðîòèâîðå÷èâû, à ÷òî êàñàåòñÿ àííîòàöèé ê äèàãíîñòè÷åñêèì íàáîðàì, ÿâíî çàâûøåíû. Ïîýòîìó öåëüþ íàñòîÿùåãî èññëåäîâàíèÿ áûëî óñòàíîâèòü ôàêòè÷åñêóþ ÷óâñòâèòåëüíîñòü è ñïåöèôè÷íîñòü íàèáîëåå ÷àñòî èñïîëüçóþùèõñÿ ìåòîäîâ ïðè äèàãíîñòèêå õëàìèäèéíîé èíôåêöèè óðîãåíèòàëüíîãî òðàêòà è ðàçðàáîòàòü òåõíîëîãèþ èõ ïðèìåíåíèÿ äëÿ äèàãíîñòèêè çàáîëåâàíèÿ.

Ìàòåðèàëû è ìåòîäû

 îñíîâó ðàáîòû ïîëîæåíû ðåçóëüòàòû îáñëåäîâàíèÿ 856 æåíùèí ñ ïîäîçðåíèåì íà íàëè÷èå ÓÃÕ. Âñåì ïàöèåíòêàì â ñîñêîáàõ èç óðåòðû è/èëè öåðâèêàëüíîãî êàíàëà îïðåäåëÿëè ìåòîäîì ÏÖÐ ÄÍÊ Chlamydia trachomatis íàáîðàìè «ÀìïëèÑåíñ-200 Chlamydia trachomatis – 330/700» ïðîèçâîäñòâà ÍÈÈ Ýïèäåìèîëîãèè ÌÇ ÐÔ, ñ ïðàéìåðàìè ê ÄÍÊ êðèïòè÷åñêîé ïëàçìèäû 330 ï.í. Ïðîäóêòû àìïëèôèêàöèè èäåíòèôèöèðîâàëè ìåòîäîì ýëåêòðîôîðåçà â 1,5% àãàðîçíîì ãåëå â ïðèñóòñòâèè áðîìèñòîãî ýòèäèÿ. Ó÷åò è äîêóìåíòèðîâàíèå ðåçóëüòàòîâ èññëåäîâàíèÿ ïðîâîäèëè íà ãåëü-äîêóìåíòèðóþùåé ñèñòåìå “Gel Doc 2000” ïðîèçâîäñòâà ôèðìû “BIO-RAD”.

Íàëè÷èå ÄÍÊ Chlamydia trachomatis â ïðîáàõ ïîäòâåðæäàëè ïîâòîðíûì ÏÖÐ-èññëåäîâàíèåì, àìïëèôèêàöèþ ïðîâîäèëè íàáîðàìè “AMPLICOR CT Amplification Kit” ïðîèçâîäñòâà ôèðìû “ROCHE”, ñ ïðàéìåðàìè ê ÄÍÊ êðèïòè÷åñêîé ïëàçìèäû 207 ï.í. Äåòåêöèþ ïðîäóêòîâ ÏÖÐ ïðîâîäèëè èììóíîôåðìåíòíûì ãèáðèäèçàöèîííûì ìåòîäîì íàáîðàìè “AMPLICOR Chlamydia trachomatis Detection Kit” ôèðìû “ROCHE”. Èññëåäîâàíèÿ ïðîâîäèëè ñòðîãî ïî èíñòðóêöèè ê íàáîðàì. Çà ïîëîæèòåëüíûé ðåçóëüòàò ïðèíèìàëè òå ïðîáû, êîòîðûå áûëè ïîëîæèòåëüíûå â äâóõ òåñò-ñèñòåìàõ.

Ó 109 (12,7%) ïàöèåíòîê áûëà îáíàðóæåíà ÄÍÊ C. trachomatis.

Äàííûé ïîäõîä, ñ èñïîëüçîâàíèåì ìåòîäà ÏÖÐ ñ äâóìÿ ðàçíûìè íàáîðàìè, ðàçëè÷íûìè ïðàéìåðàìè è ìåòîäàìè äåòåêöèè ðåçóëüòàòîâ áûë ïðèìåíåí äëÿ ïîâûøåíèÿ íàäåæíîñòè è ýôôåêòèâíîñòè äèàãíîñòèêè ÓÃÕ.

Ïîìèìî ýòîãî 109 ïàöèåíòêàì ñ ïîëîæèòåëüíûìè ðåçóëüòàòàìè ÏÖÐ, à òàêæå 50 áîëüíûì ñ îòðèöàòåëüíûìè ðåçóëüòàòàìè ÏÖÐ, êîòîðûå áûëè îïðåäåëåíû ìåòîäîì ñëó÷àéíîãî âûáîðà, ïðîâîäèëè èññëåäîâàíèå íà íàëè÷èå C. trachomatis â ñîñêîáàõ èç óðåòðû è/èëè öåðâèêàëüíîãî êàíàëà êóëüòóðàëüíûì ìåòîäîì (ÊÌ). Äëÿ ýòîãî èñïîëüçîâàëè ïåðåâèâàåìûå êëåòêè McCoy. Âûÿâëåíèå õëàìèäèé â êóëüòóðå êëåòîê ïðîâîäèëè ÷åðåç 48 ÷, ìåòîäîì ÏÈÔ, íàáîðàìè «ÕëàÌîíîÑêðèí» ôèðìû «Íèàðìåäèê» ñ ìîíîêëîíàëüíûìè àíòèòåëàìè ê ëèïîïîëèñàõàðèäó õëàìèäèé.

Êðîìå òîãî, ó âñåõ ïàöèåíòîê ïðîâîäèëè èññëåäîâàíèå íà íàëè÷èå C. trachomatis â ñîñêîáàõ èç óðåòðû è/èëè öåðâèêàëüíîãî êàíàëà ìåòîäîì ÏÈÔ ñ èñïîëüçîâàíèåì íàáîðîâ «ÕëàÌîíîÑêðèí» ôèðìû «Íèàðìåäèê» ñ ìîíîêëîíàëüíûìè àíòèòåëàìè ê ëèïîïîëèñàõàðèäó õëàìèäèé, à òàêæå èññëåäîâàëè êðîâü íà íàëè÷èå àíòèòåë ê C. trachomatis êëàññîâ IgA è IgG íàáîðàìè ôèðìû “Medac Diagnostika” ìåòîäîì ÈÔÀ. Çà ïîëîæèòåëüíûé ðåçóëüòàò ñ÷èòàëè îáíàðóæåíèå C. trachomatis â ñîñêîáàõ è íàëè÷èå ïîâûøåííîãî òèòðà àíòèòåë ëþáîãî êëàññà (IgA è/èëè IgG).

Ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèé, ïîëó÷åííûå êóëüòóðàëüíûì ìåòîäîì, ìåòîäàìè ÈÔÀ è ÏÈÔ, ñðàâíèâàëè ñ äàííûìè ÏÖÐ. ×óâñòâèòåëüíîñòü è ñïåöèôè÷íîñòü âñåõ èñïîëüçóåìûõ ìåòîäîâ ïî îòíîøåíèþ ê ìåòîäó ÏÖÐ êàê ýòàëîííîìó ðàññ÷èòûâàëè ñëåäóþùèì îáðàçîì [27]:

            ×óâñòâèòåëüíîñòü = ÈÏ – ËÎ/ÈÏ õ 100%

            Ñïåöèôè÷íîñòü = ÈÎ – ËÏ/ÈÎ õ 100%

ãäå, ÈÏ – èñòèííîïîëîæèòåëüíûå ðåçóëüòàòû òåñòà; ËÎ – ëîæíîîòðèöàòåëüíûå ðåçóëüòàòû òåñòà; ÈÎ – èñòèííîîòðèöàòåëüíûå ðåçóëüòàòû òåñòà; ËÏ – ëîæíîïîëîæèòåëüíûå ðåçóëüòàòû òåñòà.

Ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèÿ è èõ îáñóæäåíèå

Ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèé, ïîëó÷åííûå êóëüòóðàëüíûì ìåòîäîì, ìåòîäàìè ÈÔÀ è ÏÈÔ, â ñðàâíåíèè ñ ïîëîæèòåëüíûìè äàííûìè ÏÖÐ ó 109 áîëüíûõ è îòðèöàòåëüíûìè – ó 50 ïàöèåíòîê ïðåäñòàâëåíû â òàáë. 1.

Òàáëèöà 1. Ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèé ïàöèåíòîâ ñ ÓÃÕ ðàçëè÷íûìè ìåòîäàìè

 

 

Ðåçóëüòàòû ÏÖÐ

Ìåòîä è åãî ðåçóëüòàòû

ÊÌ

ÏÈÔ

ÈÔÀ

ïîëîæèòåëüíûå

îòðèöàòåëüíûå

ïîëîæèòåëüíûå

îòðèöàòåëüíûå

ïîëîæèòåëüíûå

îòðèöàòåëüíûå

Ïîëîæèòåëüíûå

(n = 109)

99

10

94

15

51

58

Îòðèöàòåëüíûå

(n = 50)

-

50

2

48

3

47

 

Àíàëèç, ïðèâåäåííûõ â òàáë. 1 äàííûõ, ïîêàçûâàåò, ÷òî ó 10 ïàöèåíòîê ñ ïîëîæèòåëüíûì ðåçóëüòàòîì ÏÖÐ âûäåëèòü C. trachomatis â êóëüòóðå êëåòîê íå óäàëîñü. Íàìè ýòè ðåçóëüòàòû ðàñöåíåíû êàê ëîæíîîòðèöàòåëüíûå, îäíàêî ó âñåõ ïàöèåíòîê ñ îòðèöàòåëüíûìè äàííûìè ÏÖÐ, ðîñò C. trachomatis òàêæå íå ïîëó÷åí, ÷òî óêàçûâàåò íà âûñîêóþ ñïåöèôè÷íîñòü ÊÌ. Ëîæíîîòðèöàòåëüíûå ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèé ó åùå áîëüøåãî êîëè÷åñòâà ïàöèåíòîê ïîëó÷åíû ïðè èñïîëüçîâàíèè ìåòîäîâ ÏÈÔ è ÈÔÀ, ïðè÷åì äëÿ äàííûõ ìåòîäîâ áûëè õàðàêòåðíû è ëîæíîïîëîæèòåëüíûå ðåçóëüòàòû â ãðóïïå 50 ïàöèåíòîê ñ îòðèöàòåëüíûìè äàííûìè ÏÖÐ è ÊÌ.

Ñîãëàñíî ðåêîìåíäàöèÿì Åâðîïåéñêîãî ðóêîâîäñòâà ïî äèàãíîñòèêå è ëå÷åíèþ óðîãåíèòàëüíîãî õëàìèäèîçà [31], èäåàëüíûé äèàãíîñòè÷åñêèé òåñò, êîòîðûé ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàí äëÿ äèàãíîñòèêè ÓÃÕ äîëæåí èìåòü ÷óâñòâèòåëüíîñòü áîëåå 90 % è ñïåöèôè÷íîñòü âûøå 99 %.  íàèáîëüøåé ñòåïåíè ýòèì òðåáîâàíèÿì óäîâëåòâîðÿþò ìåòîäû, îñíîâàííûå íà àìïëèôèêàöèè íóêëåèíîâûõ êèñëîò. Îñíîâíûìè ðàçíîâèäíîñòÿìè ýòîãî ìåòîäà ÿâëÿþòñÿ ïîëèìåðàçíàÿ öåïíàÿ ðåàêöèÿ (ÏÖÐ) è ëèãàçíàÿ öåïíàÿ ðåàêöèÿ (ËÖÐ).

×óâñòâèòåëüíîñòü è ñïåöèôè÷íîñòü ìåòîäîâ, èñïîëüçîâàííûõ â íàøåì èññëåäîâàíèè, ïî ñðàâíåíèþ ñ äàííûìè ëèòåðàòóðû, ïðåäñòàâëåíû â òàáë. 2.

Òàáëèöà 2. ×óâñòâèòåëüíîñòü è ñïåöèôè÷íîñòü ìåòîäîâ ëàáîðàòîðíîé äèàãíîñòèêè ÓÃÕ ïî ñðàâíåíèþ ñ ìåòîäîì ÏÖÐ

 

Ìåòîä

×óâñòâèòåëüíîñòü, %

Ñïåöèôè÷íîñòü, %

äàííûå ëèòåðàòóðû

ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû

äàííûå ëèòåðàòóðû

ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû

Êóëüòóðàëüíûé

80–95

90,8

100,0

100,0

Ïðÿìàÿ èììóíîôëóîðåñöåíöèÿ

50–90

86,2

85–95

96,0

Èììóíîôåðìåíòíûé àíàëèç

20–85

46,8

80–95

94,0

Êàê âèäíî èç òàáë. 2, èñïîëüçîâàííûå â íàøåì èññëåäîâàíèè ìåòîäû äèàãíîñòèêè ÓÃÕ ñóùåñòâåííî ðàçëè÷àþòñÿ ïî îñíîâíûì îïåðàöèîííûì õàðàêòåðèñòèêàì, êîòîðûå ïîëîæåíû â îñíîâó äîêàçàòåëüíîé ìåäèöèíû, – ÷óâñòâèòåëüíîñòè è ñïåöèôè÷íîñòè.

Ìåòîä ÏÖÐ. Â îñíîâå ìåòîäà ëåæèò ìíîãîêðàòíîå êîïèðîâàíèå (àìïëèôèêàöèÿ) îïðåäåëåííîãî ôðàãìåíòà ÄÍÊ, êîòîðûé ÿâëÿåòñÿ ìàðêåðíûì äëÿ äàííîãî âèäà âîçáóäèòåëÿ. Ê ïðåèìóùåñòâàì ýòîãî ìåòîäà îòíîñÿòñÿ âûñîêàÿ ÷óâñòâèòåëüíîñòü è ñïåöèôè÷íîñòü [2, 6, 8, 9, 10, 11, 12, 14, 17, 20, 21, 26, 30, 31], à òàêæå âîçìîæíîñòü òåñòèðîâàíèÿ áîëüøîãî ÷èñëà îáðàçöîâ. Ìåòîä ìîæåò èñïîëüçîâàòüñÿ êàê ñ èíâàçèâíûìè (èç øåéêè ìàòêè, èç óðåòðû), òàê è ñ íåèíâàçèâíûìè îáðàçöàìè (ìî÷à, îáðàçöû, ïîëó÷åííûå èç îáëàñòè âóëüâû è èç âëàãàëèùà). Ê íåäîñòàòêàì ìîæíî îòíåñòè âûñîêóþ ñòîèìîñòü, îñîáûå òðåáîâàíèÿ äëÿ ïðåäóïðåæäåíèÿ êîíòàìèíàöèè â ëàáîðàòîðèè; ïðîáëåìû, ñâÿçàííûå ñ èíãèáèòîðàìè, îñîáåííî ïðè èñïîëüçîâàíèè îáðàçöîâ ìî÷è [32, 33].

Êóëüòóðàëüíîå èññëåäîâàíèå. Ìåòîä âûäåëåíèÿ õëàìèäèé â êóëüòóðå êëåòîê ïðèíÿò êàê «çîëîòîé ñòàíäàðò» äèàãíîñòèêè.  òå÷åíèå ìíîãèõ ëåò ïðè äèàãíîñòèêå ÓÃÕ ïðåäïî÷òåíèå îòäàâàëîñü ìåòîäó êóëüòóðàëüíîãî èññëåäîâàíèÿ, ïîçâîëÿþùåìó îáíàðóæèâàòü æèçíåñïîñîáíûå ìèêðîîðãàíèçìû. Îäíàêî èñïîëüçîâàíèå ñîâðåìåííûõ ìîëåêóëÿðíî-áèîëîãè÷åñêèõ ìåòîäîâ ïîêàçàëî, ÷òî ÷óâñòâèòåëüíîñòü ÊÈ íå ïðåâûøàåò 60-80 %. ×óâñòâèòåëüíîñòü è ñïåöèôè÷íîñòü ìåòîäà ïî ñðàâíåíèþ ñ ÏÖÐ ïî íàøèì äàííûì ñîñòàâèëà 90,8 è 100,0 % ñîîòâåòñòâåííî. Êðîìå òîãî, ðåçóëüòàòû ÊÈ âî ìíîãîì çàâèñÿò îò ñòðîãîãî âûïîëíåíèÿ òåìïåðàòóðíîãî ðåæèìà òðàíñïîðòèðîâêè îáðàçöîâ.  íàñòîÿùåå âðåìÿ â ÑØÀ, à òàêæå â áîëüøèíñòâå äðóãèõ ñòðàí îòñóòñòâóþò ñòàíäàðòèçèðîâàííûå èëè ðåãëàìåíòèðîâàííûå ìåòîäèêè êóëüòóðàëüíîé äèàãíîñòèêè õëàìèäèéíîé èíôåêöèè, â ðåçóëüòàòå ÷åãî îòìå÷àåòñÿ íåñîâïàäåíèå äàííûõ, ïîëó÷åííûõ â ðàçëè÷íûõ äèàãíîñòè÷åñêèõ öåíòðàõ.  Êàíàäå èìåþòñÿ ñïåöèàëüíî óòâåðæäåííûå ðåôåðåíñ - ëàáîðàòîðèè, êîòîðûå ïðîâîäÿò êóëüòóðàëüíûå èññëåäîâàíèÿ äëÿ ñóäåáíûõ ðàçáèðàòåëüñòâ.  òî æå âðåìÿ âûñîêàÿ ñïåöèôè÷íîñòü ÊÌ ïîçâîëÿåò ðåêîìåíäîâàòü åãî ïðèìåíåíèå äëÿ äèàãíîñòèêè ãåíèòàëüíîé õëàìèäèéíîé èíôåêöèè ó äåòåé ðàííåãî âîçðàñòà [30]. Ê íåäîñòàòêàì ìåòîäà îòíîñÿòñÿ ñòðîãèå òðåáîâàíèÿ ê òåìïåðàòóðíîìó ðåæèìó òðàíñïîðòèðîâêè îáðàçöîâ, íåîáõîäèìîñòü â îïûòíîì ïåðñîíàëå, âûñîêàÿ òðóäîåìêîñòü è äîðîãîâèçíà èññëåäîâàíèÿ [15, 24, 25, 31].

Ìåòîäû ïðÿìîé èììóíîôëóîðåñöåíöèè. Îñíîâàíû íà îáíàðóæåíèè àíòèãåííûõ ñóáñòàíöèé õëàìèäèé â ýïèòåëèè è äðóãèõ òêàíÿõ ïóòåì îáðàáîòêè ïðåïàðàòîâ ñïåöèôè÷åñêèìè àíòèòåëàìè. Àíòèòåëà äèàãíîñòè÷åñêîé àíòèõëàìèäèéíîé ñûâîðîòêè ñîåäèíåíû ñ ëþìèíåñöèðóþùåé ìåòêîé (ÔÈÒÖ - àíòèòåëà). Êàê ïðàâèëî, èììóíîôëóîðåñöåíòíûå è èììóíîôåðìåíòíûå ìåòîäû âûñîêîñïåöèôè÷íû. Ýòà ñïåöèôè÷íîñòü îãðàíè÷èâàåòñÿ ëèøü òåì, ÷òî ðÿä áàêòåðèé (ñàëüìîíåëëû, àêèíåòîáàêòåðèè) èìåþò â ñâîåì ñîñòàâå îáùèé ñ õëàìèäèÿìè ëèïîïîëèñàõàðèäíûé àíòèãåí, çà ñ÷åò êîòîðîãî âîçìîæíû ëîæíîïîëîæèòåëüíûå ðåçóëüòàòû [4]. Ïîëó÷åííûå íàìè ðåçóëüòàòû ñâèäåòåëüñòâóþò î íåäîñòàòî÷íî âûñîêîé ÷óâñòâèòåëüíîñòè ìåòîäà ÏÈÔ (86,2 %) ïî ñðàâíåíèþ ñ ÏÖÐ. Ìàòåðèàëîì äëÿ èññëåäîâàíèÿ ñëóæàò ñîñêîáû èç óðåòðû è öåðâèêàëüíîãî êàíàëà, ìî÷à. Èç íåäîñòàòêîâ ñëåäóåò îòìåòèòü, ÷òî ìåòîä òðåáóåò ìíîãî âðåìåíè íà èññëåäîâàíèå, â ñâÿçè ñ ÷åì íå ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàí äëÿ àíàëèçà áîëüøîãî ÷èñëà îáðàçöîâ, è çàâèñèò îò êâàëèôèêàöèè âðà÷à [1, 4, 5, 13, 19, 31].

Ìåòîä èììóíîôåðìåíòíîãî àíàëèçà. Ìåòîä ÈÔÀ èñïîëüçóþò êàê äëÿ îïðåäåëåíèÿ àíòèãåíîâ õëàìèäèé â èññëåäóåìîì ìàòåðèàëå (óðîãåíèòàëüíûå è êîíúþíêòèâàëüíûå îáðàçöû), òàê è äëÿ îïðåäåëåíèÿ àíòèòåë ðàçëè÷íûõ êëàññîâ â ñûâîðîòêå êðîâè: IgM, IgA, IgG [3, 16].  ïåðâîì ñëó÷àå ìåòîä ÈÔÀ ïîçâîëÿåò îáíàðóæèòü ðîäîñïåöèôè÷åñêèé ëèïîïîëèñàõàðèäíûé àíòèãåí õëàìèäèé. Îäíàêî â êëèíè÷åñêîé ïðàêòèêå íàèáîëåå øèðîêîå ðàñïðîñòðàíåíèå ïîëó÷èëè ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë. Âî âðåìÿ îñòðîé õëàìèäèéíîé èíôåêöèè è âñêîðå ïîñëå íåå íàáëþäàåòñÿ ïîâûøåíèå òèòðà àíòèòåë IgÀ, IgÌ è IgG ê Chlamydia trachomatis â êðîâè. Èíôèöèðîâàííûé Chlamydia trachomatis îðãàíèçì ïðîäóöèðóåò àíòèòåëà, êîòîðûå èìåþò ñëàáîå çàùèòíîå äåéñòâèå: îáû÷íî âîçáóäèòåëè ïåðñèñòèðóþò äàæå ïðè íàëè÷èè âûñîêèõ òèòðîâ àíòèòåë. Ðàííåå èíòåíñèâíîå ëå÷åíèå ìîæåò óãíåòàòü ñèíòåç àíòèòåë. Ïðè õðîíè÷åñêîé èíôåêöèè, îñîáåííî ïðè ïåðñèñòåíöèè õëàìèäèé, âåðîÿòíîñòü îïðåäåëåíèÿ âûñîêèõ òèòðîâ àíòèòåë íåâåëèêà, ÷òî ïðèâîäèò ê ëîæíîîòðèöàòåëüíûì ðåçóëüòàòàì èññëåäîâàíèÿ [7, 16, 23]. Êàê è ïðè ëþáîé äðóãîé ðåàêöèè, ïðè ÈÔÀ âîçìîæåí ëîæíîïîëîæèòåëüíûé ðåçóëüòàò. Íàèáîëåå ÷àñòî îí âñòðå÷àåòñÿ ïðè îïðåäåëåíèè ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë êëàññà IgM è ìîæåò áûòü îáóñëîâëåí íàëè÷èåì ðåâìàòîèäíîãî ôàêòîðà, ôèçèîëîãè÷åñêîé ãèïåðïðîäóêöèåé IgM ïðè áåðåìåííîñòè, ïåðåêðåñòíîé ðåàêöèåé ñ àíòèãåíàìè äðóãèõ âîçáóäèòåëåé, àóòîèììóííûì ïðîöåññîì, íàðóøåíèåì îáìåíà âåùåñòâ è äð. [22]. ×óâñòâèòåëüíîñòü è ñïåöèôè÷íîñòü ìåòîäà ÈÔÀ ïî äàííûì ðàçíûõ àâòîðîâ íåâûñîêà [3, 7, 18, 22, 28, 31, 32]. Ýòî ïîäòâåðæäàþò è ïîëó÷åííûå íàìè ðåçóëüòàòû: ÷óâñòâèòåëüíîñòü – 46,8 %, ñïåöèôè÷íîñòü 94,0 %.  öåëîì ñåðîëîãè÷åñêèå ìåòîäû äèàãíîñòèêè èìåþò áîëüøîå çíà÷åíèå ïðè ýïèäåìèîëîãè÷åñêèõ îáñëåäîâàíèÿõ êîíòèíãåíòîâ ëèö, êîòîðûå îòíîñÿòñÿ ê ãðóïïå ðèñêà çàðàæåíèÿ õëàìèäèÿìè [7, 18]. 

Àíàëèç ïîëó÷åííûõ íàìè ðåçóëüòàòîâ ïîêàçûâàåò, ÷òî òîëüêî 2 ìåòîäà óäîâëåòâîðÿþò òðåáîâàíèÿì Åâðîïåéñêîãî ðóêîâîäñòâà ïî äèàãíîñòèêå è ëå÷åíèþ óðîãåíèòàëüíîãî õëàìèäèîçà [31]: ìåòîä ÏÖÐ è êóëüòóðàëüíûé ìåòîä. Êðîìå òîãî, äëÿ äèàãíîñòèêè ÓÃÕ ïðåäïî÷òèòåëüíåå èñïîëüçîâàòü ìåòîä ÏÖÐ ñ äâóìÿ òåñò-ñèñòåìàìè è ðàçëè÷íûìè ïðàéìåðàìè, òàê êàê ïðèìåíåíèå êóëüòóðàëüíîãî èññëåäîâàíèÿ ñâÿçàíî ñî çíà÷èòåëüíûìè òðóäíîñòÿìè, îí óñòóïàåò ìåòîäó ÏÖÐ ïî ÷óâñòâèòåëüíîñòè è ñïåöèôè÷íîñòè è íå ñòàíäàðòèçîâàí. Èñïîëüçîâàíèå ìåòîäà ÏÈÔ îáîñíîâàíî òàì, ãäå íåò âîçìîæíîñòè ïðîâåäåíèÿ èññëåäîâàíèé ìåòîäîì ÏÖÐ. Ìåòîä ÈÔÀ, ïî íàøåìó ìíåíèþ, ìîæíî ïðèìåíÿòü òîëüêî äëÿ ýïèäåìèîëîãè÷åñêèõ îáñëåäîâàíèé ãðóïï ðèñêà (èç-çà åãî íèçêîé ÷óâñòâèòåëüíîñòè è ñïåöèôè÷íîñòè). Èñïîëüçîâàíèå êîìáèíàöèè ìåòîäîâ äëÿ äèàãíîñòèêè ÓÃÕ, ÷òî ðåêîìåíäóþò íåêîòîðûå àâòîðû (íàïðèìåð, ÏÈÔ è ÏÖÐ), êàê ïîêàçàëè ðåçóëüòàòû íàøèõ èññëåäîâàíèé, íå èìååò ïîä ñîáîé âåñêîãî îñíîâàíèÿ, òàê êàê íåëüçÿ ïðèìåíÿòü íà ïåðâîì ýòàïå îáñëåäîâàíèÿ ìåíåå ÷óâñòâèòåëüíûé ìåòîä, èç-çà ðèñêà ïîëó÷åíèÿ áîëüøîãî êîëè÷åñòâà ëîæíîîòðèöàòåëüíûõ ðåçóëüòàòîâ.

Ñõåìà 1. Àëãîðèòì îáñëåäîâàíèÿ íà íàëè÷èå âîçáóäèòåëåé óðîãåíèòàëüíûõ èíôåêöèé

Ëàáîðàòîðíûå ìåòîäû èìåþò áîëüøîå çíà÷åíèå íå òîëüêî äëÿ äèàãíîñòèêè ÓÃÕ. Î÷åíü âàæíî äëÿ íàçíà÷åíèÿ ïðàâèëüíîé ñõåìû ëå÷åíèÿ óñòàíîâèòü è íàëè÷èå äðóãèõ âîçáóäèòåëåé èíôåêöèé ïåðåäàâàåìûõ ïîëîâûì ïóòåì, òàê êàê õëàìèäèîç ðåäêî áûâàåò ïðåäñòàâëåí â âèäå ìîíî èíôåêöèè. Íàèáîëåå ÷àñòî âðà÷è-êëèíèöèñòû (ãèíåêîëîãè, óðîëîãè, äåðìàòîâåíåðîëîãè) âñòðå÷àþòñÿ ñ ìèêñò èíôåêöèåé. Ïîýòîìó áîëüíîé äîëæåí áûòü îáñëåäîâàí è íà äðóãèå èíôåêöèè. Íà îñíîâàíèè ïîëó÷åííûõ ðåçóëüòàòîâ íàìè ðàçðàáîòàí àëãîðèòì, ïðåäñòàâëåííûé íà ñõåìå 1, îáñëåäîâàíèÿ áîëüíîãî ñ ïîäîçðåíèåì íà íàëè÷èå óðîãåíèòàëüíîé èíôåêöèè.

Äàííûé àëãîðèòì îáñëåäîâàíèÿ íà íàëè÷èå âîçáóäèòåëåé óðîãåíèòàëüíûõ èíôåêöèé â íàøåì ëå÷åáíîì ó÷ðåæäåíèè èñïîëüçóåòñÿ óæå áîëåå äâóõ ëåò. Çà ýòî âðåìÿ íàìè áûëà îáñëåäîâàíà 7461 æåíùèíà ïðè åæåãîäíîì ìåäèöèíñêîì îáñëåäîâàíèè, ïî íàïðàâëåíèþ ãèíåêîëîãà â âîçðàñòå îò 23 äî 45 ëåò.

Çàáîð ìàòåðèàëà ïðîèçâîäèëñÿ âðà÷îì-ãèíåêîëîãîì, âñåì ïàöèåíòàì áðàëèñü ìàçêè èç öåðâèêàëüíîãî êàíàëà è óðåòðû íà ñòåêëî (2 ñòåêëà) è ñîñêîáû èç óðåòðû è öåðâèêàëüíîãî êàíàëà ñïåöèàëüíûì çîíäîì è ïîìåùàëèñü â ïðîáèðêè òèïà Ýïïåíäîðô ñ òðàíñïîðòíîé ñðåäîé ïðîèçâîäñòâà ÍÈÈ Ýïèäåìèîëîãèè ÌÇ ÐÔ. Áèîëîãè÷åñêèé ìàòåðèàë äîñòàâëÿëñÿ â ëàáîðàòîðèþ, ãäå ïðîâîäèëèñü èññëåäîâàíèÿ.

Ìèêðîñêîïèþ ìàçêîâ ïðîâîäèëè ïîñëå ôèêñàöèè è îêðàñêè 1% âîäíûì ðàñòâîðîì ìåòèëåíîâîãî ñèíåãî è ïî Ãðàìó äëÿ âûÿâëåíèÿ òðèõîìîíàä, ãîíîêîêêîâ è ìèêðîôëîðû âëàãàëèùà.

ÄÍÊ âûäåëÿëè íàáîðàìè «ÄÍÊ-ñîðá-À» ïðîèçâîäñòâà ÍÈÈ Ýïèäåìèîëîãèè ÌÇ ÐÔ, ñîãëàñíî èíñòðóêöèè ê íàáîðó, äëÿ ïðîâåäåíèÿ ÏÖÐ-èññëåäîâàíèÿ.

Âñåì ïàöèåíòêàì îïðåäåëÿëè ìåòîäîì ÏÖÐ ÄÍÊ Chlamydia trachomatis íàáîðàìè «ÀìïëèÑåíñ-200 Chlamydia trachomatis – 330/700»; ÄÍÊ Mycoplasma hominis íàáîðàìè «ÀìïëèÑåíñ-200 Mycoplasma hominis – 330»; ÄÍÊ Mycoplasma genitalium íàáîðàìè «ÀìïëèÑåíñ-100 Mycoplasma genitalium – 280»; ÄÍÊ Ureaplasma urealyticum íàáîðàìè «ÀìïëèÑåíñ-200 Ureaplasma urealyticum – 450»; ÄÍÊ Neisseria gonorrhoeae íàáîðàìè «ÀìïëèÑåíñ-100 Neisseria gonorrhoeae»; ÄÍÊ öèòîìåãàëîâèðóñà íàáîðàìè «ÀìïëèÑåíñ-50 CMV – 500/800 – ÂÊλ; ÄÍÊ âèðóñà ïðîñòîãî ãåðïåñà I è II òèïîâ íàáîðàìè «ÀìïëèÑåíñ-100 HSV – 430»; ÄÍÊ âèðóñà ïàïèëëîìû ÷åëîâåêà 16 è 18 òèïîâ íàáîðàìè «ÀìïëèÑåíñ HPV 16/18» âñå íàáîðû ïðîèçâîäñòâà ÍÈÈ Ýïèäåìèîëîãèè ÌÇ ÐÔ; ÄÍÊ Trichomonas vaginalis íàáîðàìè «ÒÐÈÏÎË» ïðîèçâîäñòâà ÍÏÔ «Ëèòåõ» (Ðîññèÿ).

Âñå èññëåäîâàíèÿ ïðîâîäèëè â ñòðîãîì ñîîòâåòñòâèè èíñòðóêöèÿì ê íàáîðàì. Ïðîäóêòû àìïëèôèêàöèè èäåíòèôèöèðîâàëè ìåòîäîì ýëåêòðîôîðåçà â 1,5 % àãàðîçíîì ãåëå â ïðèñóòñòâèè áðîìèñòîãî ýòèäèÿ. Ó÷åò è äîêóìåíòèðîâàíèå ðåçóëüòàòîâ èññëåäîâàíèÿ ïðîâîäèëè íà ãåëü-äîêóìåíòèðóþùåé ñèñòåìå “Gel Doc 2000” ïðîèçâîäñòâà ôèðìû “BIO-RAD” (ÑØÀ).

Íàëè÷èå ÄÍÊ Chlamydia trachomatis â ïðîáàõ ïîäòâåðæäàëè ïîâòîðíûì ÏÖÐ-èññëåäîâàíèåì, àìïëèôèêàöèþ ïðîâîäèëè íàáîðàìè “AMPLICOR CT Amplification Kit” ïðîèçâîäñòâà ôèðìû “ROCHE” (ÑØÀ). Äåòåêöèþ ïðîäóêòîâ ÏÖÐ ïðîâîäèëè èììóíîôåðìåíòíûì ãèáðèäèçàöèîííûì ìåòîäîì íàáîðàìè “AMPLICOR Chlamydia trachomatis Detection Kit” ïðîèçâîäñòâà ôèðìû “ROCHE” (ÑØÀ). Èññëåäîâàíèÿ ïðîâîäèëè ñòðîãî ïî èíñòðóêöèè ê íàáîðàì. Çà ïîëîæèòåëüíûé ðåçóëüòàò ïðèíèìàëè òå ïðîáû, êîòîðûå áûëè ïîëîæèòåëüíûå â äâóõ òåñò-ñèñòåìàõ.

Íàëè÷èå Neisseria gonorrhoeae ïîäòâåðæäàëè êóëüòóðàëüíûì ìåòîäîì. Ìàòåðèàë äëÿ èññëåäîâàíèÿ çàáèðàëè ñ ïîìîùüþ òàìïîíà, êîòîðûé ïîìåùàëñÿ â òðàíñïîðòíóþ ñðåäó è äîñòàâëÿëñÿ â ëàáîðàòîðèþ ñ ñîáëþäåíèåì òåìïåðàòóðíûõ óñëîâèé. Ïîñåâ áèîìàòåðèàëà ïðîèçâîäèëè íà ñåëåêòèâíóþ ãîòîâóþ ñðåäó «Íåéññåðèÿ» (Íåéññåðèÿ Àãàð) ïðîèçâîäñòâà ôèðìû “BIO-RAD” (ÑØÀ). Èíäèêàöèþ ïàòîãåííûõ íåéññåðèé îñóùåñòâëÿëè ÷åðåç 3 ñóòîê îêñèäàçíûì òåñòîì ïðîèçâîäñòâà òîé æå ôèðìû.

Íàëè÷èå Trichomonas vaginalis òàêæå ïîäòâåðæäàëè êóëüòóðàëüíûì ìåòîäîì. Ïðîáû çàáèðàëèñü è äîñòàâëÿëèñü àíàëîãè÷íî îïèñàííûì äëÿ Neisseria gonorrhoeae. Ïîñåâ áèîìàòåðèàëà ïðîâîäèëè íà 2-õ ôàçíóþ ñðåäó (ðàñòâîð Ðèíãåðà ñ êðàõìàëîì/êîàãóëèðîâàííàÿ ñûâîðîòêà) ïðîèçâîäñòâà ôèðìû “BIO-RAD” (ÑØÀ). Ðîñò òðèõîìîíàä íàáëþäàëè íà ãðàíèöå ôàç. Íà 3-4-å ñóòêè ïðîâîäèëè ìèêðîñêîïè÷åñêîå èññëåäîâàíèå.

 ñëó÷àå âûÿâëåíèÿ Mycoplasma hominis è/èëè Ureaplasma urealyticum ìåòîäîì ÏÖÐ, ýòèì áîëüíûì ïîâòîðíî áðàëè ìàçêè èç óðåòðû è öåðâèêàëüíîãî êàíàëà, òàìïîíû ïîìåùàëèñü âî ôëàêîí ñî ñïåöèàëüíîé òðàíñïîðòíîé ñðåäîé èç íàáîðà «Mycoplasma DUO» ôèðìû «BIO–RAD» (ÑØÀ).

Äàëåå ïðîâîäèëîñü áàêòåðèîëîãè÷åñêîå èññëåäîâàíèå ñ ïîìîùüþ äèàãíîñòè÷åñêèõ òåñò-ñèñòåì «Mycoplasma DUO» ôèðìû «BIO–RAD» (ÑØÀ), êîòîðûå ïîçâîëÿþò ïðîâåñòè èäåíòèôèêàöèþ ìèêîïëàçì (Mycoplasma hominis è/èëè Ureaplasma urealyticum) è óñòàíîâèòü èõ òèòð.

 ðåçóëüòàòå ïðîâåäåííûõ èññëåäîâàíèé ó 1030 (13,81 %) ïàöèåíòîê áûëà âûÿâëåíà ÄÍÊ Chlamydia trachomatis, êàê â âèäå ìîíî èíôåêöèè, òàê è â ðàçëè÷íûõ ñî÷åòàíèÿõ ñ äðóãèìè èíôåêöèÿìè. Ñòðóêòóðà áîëüíûõ ÓÃÕ ïðåäñòàâëåíà íà ðèñóíêå 1, èç êîòîðîãî âèäíî, ÷òî õëàìèäèéíàÿ ìîíî èíôåêöèÿ áûëà âûÿâëåíà òîëüêî ó 270 (26,21%) ïàöèåíòîê.

 

Ðèñ. 4. Ñòðóêòóðà áîëüíûõ ÓÃÕ.

Òàêèì îáðàçîì, ïðîâåäåííûå èññëåäîâàíèÿ ïîêàçàëè, ÷òî äèàãíîñòèêà ÓÃÕ ïðåäñòàâëÿåò â êëèíè÷åñêîé ïðàêòèêè çíà÷èòåëüíûå òðóäíîñòè íå òîëüêî â ïëàíå âûáîðà àäåêâàòíûõ ìåòîäîâ äèàãíîñòèêè çàáîëåâàíèÿ, íî è âñëåäñòâèå ÷àñòîé ðàñïðîñòðàíåííîñòè ìèêñò èíôåêöèè (ó 73,79 % áîëüíûõ).  ñâÿçè ñ ýòèì âñåõ ïàöèåíòîâ ñ ïîëîæèòåëüíûìè ðåçóëüòàòàìè èññëåäîâàíèÿ íà ÓÃÕ íåîáõîäèìî îáñëåäîâàòü è íà äðóãèå èíôåêöèè, âûçûâàþùèå çàáîëåâàíèÿ ìî÷åïîëîâîãî òðàêòà.

Ìåòîä ÏÖÐ îáëàäàåò íàèáîëüøåé ÷óâñòâèòåëüíîñòüþ è ñïåöèôè÷íîñòü äëÿ äèàãíîñòèêè ÓÃÕ. Êðîìå òîãî, êàê ïîêàçûâàþò ðåçóëüòàòû íàøèõ èññëåäîâàíèé, îí ìîæåò ñëóæèòü îñíîâîé äëÿ îáíàðóæåíèÿ áîëüøèíñòâà äðóãèõ ýòèîëîãè÷åñêèõ ôàêòîðîâ âîñïàëèòåëüíûõ çàáîëåâàíèé ìî÷åïîëîâîé ñôåðû. Êóëüòóðàëüíûì (áàêòåðèîëîãè÷åñêèì) ìåòîäàì îòâîäèòñÿ âñïîìîãàòåëüíàÿ ðîëü.

 íàñòîÿùåå âðåìÿ íå îïðåäåëåíû ïîêàçàíèÿ ê ïðèìåíåíèþ òîãî èëè èíîãî ìåòîäà äëÿ äèàãíîñòèêè èíôåêöèé óðîãåíèòàëüíîãî òðàêòà. Ðåêîìåíäàöèè ñâîäÿòñÿ ê ïîñòóëàòó «Äèàãíîñòèêà äîëæíà áûòü êîìïëåêñíîé», îäíàêî íå ÿñíî, ÷òî êîíêðåòíî äîëæíî âõîäèòü â ýòîò «êîìïëåêñ».  ñâÿçè ñ ýòèì ðàçðàáîòàííûé íàìè àëãîðèòì äèàãíîñòèêè èíôåêöèé óðîãåíèòàëüíîãî òðàêòà, â îñíîâó êîòîðîãî ïîëîæåíû äâà ìåòîäà – ÏÖÐ è êóëüòóðàëüíûé ìåòîä, íàèáîëåå àäåêâàòíî îòâå÷àåò òðåáîâàíèÿ êëèíè÷åñêîé ïðàêòèêè íà ñîâðåìåííîì ýòàïå ðàçâèòèÿ ïðàêòè÷åñêîé ìåäèöèíû.

 

ÑÏÈÑÎÊ ËÈÒÅÐÀÒÓÐÛ

1. Çóëüêàðíååâ Ð.Ø., Êàëèíèí Þ.Ò., Àôàíàñüåâ Ñ.Ñ. è äð. Ñðàâíèòåëüíîå èçó÷åíèå èíôîðìàòèâíîñòè èììóíîôëóîðåñöåíòíîé è èììóíîõðîìàòîãðàôè÷åñêîé èäåíòèôèêàöèè àíòèãåíîâ Chlamydia trachomatis â ñîñêîáàõ èç öåðâèêàëüíîãî êàíàëà è öèòîëîãè÷åñêîé êàðòèíû âàãèíàëüíîãî îòäåëÿåìîãî ó áåðåìåííûõ // Æ. ìèêðîáèîë. ýïèäåìèîë. èììóíîë. – 1998. - ¹ 1. – Ñ. 64-67.

2. Èâàíîâà Â.Ñ., Ñèãóíîâà Í.Í., Ñóõîâà À.Ï. è äð. Îá îïûòå èñïîëüçîâàíèÿ ñîâðåìåííûõ ìåòîäîâ äèàãíîñòèêè óðîãåíèòàëüíîãî õëàìèäèîçà. // Âåñòí. äåðìàòîë. âåíåðîë. – 1998. - ¹ 5. – Ñ. 62-63.

3. Íàçàðåíêî Ã.È., Êèøêóí À.À. Êëèíè÷åñêàÿ îöåíêà ðåçóëüòàòîâ ëàáîðàòîðíûõ èññëåäîâàíèé. // Ì.: «Ìåäèöèíà», 2000: 544 ñ.

4. Íàçàðîâà Å.Ê., Ìàçóð÷óê Ñ.À. Èììóíîôëóîðåñöåíòíàÿ äèàãíîñòèêà èíôåêöèé óðîãåíèòàëüíîãî òðàêòà. // Ëàáîðàòîðèÿ. – 1998. - ¹ 9. – Ñ. 16–17.

5. Ñèäîðîâè÷ Ñ.Þ., Ëàòûïîâà Ì.Ô., Êîëèêîâà Ò.Ã. è äð. Ñðàâíèòåëüíûé àíàëèç ìåòîäîâ ëàáîðàòîðíîé äèàãíîñòèêè óðîãåíèòàëüíîãî õëàìèäèîçà // Âåñòí. äåðìàòîë. âåíåðîë. – 2001. - ¹ 1. – Ñ. 9-10.

6. Bianchi A., Bogard M., Cessot G. et al. Kinetics of Chlamydia trachomatis clearance in patients with azithromycin, as assessed by first void urine testing by PCR and transcription-mediated amplification // Sex Transm. Dis. – 1998. – Vol. 25. - N 7. – P. 366-367.

7. Bollmann R., Engel S., Sagert D., Gobel U.B. Investigations on the detection of Chlamydia trachomatis infections in infertile male outpatients // Humboldt-Universitat zu Berlin. // Andrologia. – 1998. – Vol. 30 (Suppl 1). – P. 23-27.

8. Chernesky M., Morse S., Schachter J. Newly available and future Lab tests for sexually transmitted diseases (STDs) other than HIV // Sex. Transm. Dis. – 1999. – Vol. 26. – N 4. – P. 8-11.

9. Chernesky M., Jang D., Copes D. Et al. Use of enzyme amplyfied immunoassay (IDEIA PCE) and LCR to detect Chlamydia trachomatis in cervical swabs // Pros. Meet Eur. Soc. Chlam. Res. – 2000. 89. – P. 20-23 Helsinki, Finland.

10. Doing K.M., Curtis K., Long J.W., Volock M.L. Prospective comparison of the Gen-probe PACE 2 assay and the Abbott ligase chain reaction for the direct detection of Chlamydia trachomatis in a low prevalence population // J. Med. Microbiol. – 1999. – Vol. 48. – N 5. – P. 507-510.

11. Eastick K., Longhurst D., Paul I.D. et al. Sensitive detection of Chlamydia trachomatis using the Lightcycler – a new reference tes // Pros. Meet Eur. Soc. Chlam. Res. – 2000. 20-23 Aug., P. 93. Helsinki, Finland.

12. Ferrero V., Buck–Burrington L., CuerpoJ. Et al. Comparison of the COBAS AMPLICOR and BD ProbeTec ET nucleic acid amplification systems in detecting Chlamydia trachomatis from urine specimens // Pros. Meet Eur. Soc. Chlam. Res. – 2000, 20-23 Aug., P. 96. Helsinki, Finland.

13. Forsey Th., Peterson E. Comparison of immunofluorescence tests for detecting antibodies to Chlamidia trachomatis // J. Clin. Microbiol. – 1989. – Vol. 27. – N 10. – P. 2400-2406.

14. Honey E.J., Templeton A.A Cost effectiveness of screening for Chlamydia trachomatis // Pros. Meet Eur. Soc. Chlam. Res. – 2000. 20-23 Aug., P. 416. Helsinki, Finland.

15. Kleinman D., Sharon J., Sarov J. et al. A new method for culturing human endometrium as separate epithelial and stromal components // Arch. Gynecol. – 1983. – Vol. 234. – P. 103-112.

16. Koivisto A.L., Isoaho R., Von Hertzen L. et al. Chlamydial antibodies in an elderly Finnish population // Scand. J. Infect. Dis. – 1999. – Vol. 31. – N 2. – P. 135-139.

17. Kuchinka-Koch A., Bilina A., Kerschbaumer M. et al. Evaluation of the BD ProbeTec ET system for chlamydial and gonococcal diagnosis in different specimen types // Pros. Meet Eur. Soc. Chlam. Res. – 2000. 20-23 Aug., P. 144. Helsinki, Finland.

18. Ludwig M., Hausmann G., Hausmann W. et al. Chlamydia trachomatis antibodies in serum and ejaculate of male patients without acute urethritis // Ann. Urol. – 1996. – Vol. 30. – P. 139-146.

19. Martin D.H., Pastorek J.G., Faro S. Risk factors for Chlamidia trachomatis infection in a high risk population of pregnant women // Chlamydial inf. Proc. 6th  Internat. Sym. on human Chlam. infections. Cambridge. 1986. – P. 189.

20. Mascellino M.T., Pelaia M.R., Greco E. Detection of Chlamydia trachomatis in endocervical samples with Cobas Amplicor system and Abbott LCX: comparison with serological data // Pros. Meet Eur. Soc. Chlam. Res. – 2000. 20-23 Aug., P. 119. Helsinki, Finland.

21. McCarthy M., Morris A. Frequency of and possible explanation for discrepant PCR results for Chlamydia trachomatis // Pros. Meet Eur. Soc. Chlam. Res. –2000. 20-23 Aug., P. 121. Helsinki, Finland.

22. Meijer A. Use of the broad range PCR assay for the identification and classification of bacteria in the order Chlamydiales // 4th European Chlamydia Congress “Chlamydia 2000”. Abstract book. Helsinki, 2000. – P. 42.

23. Munday P.E., Staccy C.M., Thomas B.J. et al. A etiology of pelvic pain in women with Chlamydial lower genital tract infection // Chlamydial infect.: Cambridge Univ. Press. 1990. P. 315-318.

24. Naher H., Niebauer B., Hartmann M. et all. Comparison of a radioactive and a non-radioactive rRNA: c- DNA-hybridization assay for the detection of Chlamydia trachomatis / Bowie W.R. et all. (ed.) Chlamydia infection. Cambridge: Cambridge Univ. Press. 1990. – P. 503-506.

25. Naughton H., Mallison H. Microplate culture with PAS staining for the diagnostic isolation of Chlamydia trachomatis // Med. Lab. Sci. – 1983. – Vol. 40. – N 2. – P. 193-195.

26. Ostergaard L. DNA-amplifikation til diagnostik af urogenital Chlamydia trachomatis infektion // Tiddsskr. Nor. Laegeforen. – 1999. – Vol. 119. – N 16. – P. 2350-2356.

27. Principles of Internal Medicine. Harrison’s: 12th ed. New York: McGraw Hill, 1991. – Vol. 4. – N 4. – P. 1244-1247.

28. Ruczkowska J. Badania laboratoryjne w kienrunku Chlamydia trachomatis; czy wskazuja one na spadek liczby zakazen? // Przegl Epidemiol. – 1998. – Vol. 52. – N 1-2. – P. 163-169.

29. Solomon M., Bixby T., Bott M. et al. Performance of the APTIMA Combo 2 assay for the detection of Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae // Pros. Meet Eur. Soc. Chlam. Res. – 2000. 20-23 Aug., P. 141. Helsinki, Finland.

30. Stary A. Nucleic acid amplification for STD diagnosis: advances and disadvantages // In.t J. STD & AIDS. – 2001. – Vol. 12 (Suppl 2). – P.15.

31. Stary A. European Guideline for management of Chlamydial infection // STD & AIDS. – 2001. – Vol. 12. – N 3. – P. 31-33.

32. Tanaka M., Nakayama H., Yoshida H. et al. Detection of Chlamydia trachomatis in vaginal specimens from female commercial sex workers using a new improved enzyme immunoassay // Sex Transm. Infect. – 1998. – Vol. 74. – N 6. – P. 435-438.

33. Williams J.A., Van Der Pol B., Smith N.J. et al. Comparison of the sensitivity of Chlamydia culture and PCR in a male population with a high prevalence of multiple sexually transmitted infections // Pros. Meet Eur. Soc. Chlam. Res. – 2000. 20-23 Aug., P. 152. Helsinki, Finland.